Advanced Targeting Systems丨Fab-ZAP小鼠ZAP标记物

Fab-ZAP使用您的主要小鼠单克隆IgG抗体来靶向并消除识别您的主要抗体的细胞。Fab-ZAP由单价二级抗体制成，消除了帽形成的可能性，同时保留了作为有效体外诊断工具的所有品质。所用抗体是针对小鼠IgG重链和轻链的亲和纯化多克隆抗体。本品中使用的抗体将在同一物种的免疫球蛋白类和亚类之间发生交叉反应，因为它们共享相同的轻链（κ或λ）。在细胞毒性试验中，与Mab-ZAP相比，其EC50也有所提高。

Fab-ZAP小鼠是山羊抗小鼠单价抗体和核糖体失活蛋白saporin的化学偶联物。它使用您的小鼠初级抗体来靶向和消除细胞。该二级缀合物用于评估一级抗体内化的潜力。

Advanced Targeting Systems Fab-ZAP小鼠ZAP标记物特异性和制备：

该二级缀合物识别您的小鼠抗体。Fab-ZAP是山羊抗鼠单价抗体和核糖体失活蛋白saporin的化学偶联物。用于制造FabZAP小鼠的抗体是针对小鼠IgG重链和轻链的亲和纯化多克隆抗体。

本品中使用的抗体将在免疫球蛋白类别和亚类之间发生交叉反应，因为它们共享相同的轻链（kappa或lambda）。

Advanced Targeting Systems Fab-ZAP小鼠ZAP标记物使用和储存：

Fab-ZAP使用小鼠的一级抗体来靶向和消除细胞。该次级标记物用于评估一级抗体内化的潜力。材料可能有很多不同；工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新的批次，您必须评估在开始完整的实验方案之前进行工作稀释。

使用前轻轻旋转材料；5-10秒的缩微胶片就足够了。材料应为储存在-20°C的未稀释等分试样中。材料应按方便的体积和数量进行等分避免反复冷冻和解冻，否则会损害蛋白质含量。在这些条件下具有非常稳定的保质期。解冻应在室温或冰上进行。解冻的溶液应在使用前保持在冰上。请勿将还原剂（如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸）用于此材料。它将使毒素失活。

如果一级抗体识别人受体，则缀合物将对人细胞有毒表达适当的受体。应由经验丰富的人员进行搬运。手套和安全处理本产品时需要戴眼镜。处置时必须小心；高压灭菌或暴露于0.2

M氢氧化钠会使材料失活。所有与该材料接触的实验室器皿应同样地处理。

注：当用于细胞毒性试验时，未结合的一级抗体将与一级抗体竞争

结合Fab-ZAP，并可通过竞争性抑制初级抗体-次级偶联物复合物来降低细胞毒性。

图：PC12细胞以5000个细胞/90µl/孔接种孵育过夜。在细胞中进行皂素稀释向每个孔中加入10µl。OX7抗体（AB-N08）在细胞培养基中稀释浓度，4.5 nM/10µl Fab ZAP，添加10µl每个井。培养板72小时。这个使用XTT/PMS溶液开发板在450nm下读取。通过比较处理井与对照井的井读数井，以百分比表示。活细胞数通过细胞测量发育当天的剩余量比色分子在细胞内的代谢开发试剂。

Advanced Targeting Systems/ATSbio Fab-ZAP小鼠ZAP标记物文献参考：

1. Kohls MD, Lappi DA (2000) Mab-ZAP: A tool for evaluating antibody efficacy for use in an immunotoxin.

BioTechniques 28(1):162-165.