体内药物分析——分析方法设计与评价

1.设定分析方法的依据:
(1)重视并做好文献总结和整理工作；

(二)充分了解待测药物的特性及其在体内的存在情况；

(3)确定测量的目的和要求；

(4)实验室条件。

二。方法建立的一般实验步骤:

(1)纯品测定:应根据建议的方法测定一定量的纯品。得到浓度与测量响应值之间的关系(如吸光度、峰高或峰面积等。)，浓度的线性范围，最佳浓度，检测灵敏度，最佳条件(pH，温度，反应时间)等等。

(2)使用纯化的空白色样品进行测定；

(三)空加标后白色样品的测定:将一定量的标准样品加入到血样等样品中进行测定，以获得样品回收率的数据，检查生物样品是否干扰测定。

(4)体内实际样品的测定:有时，当用体外建立的方法测定体内获得的实际样品时，会得出错误的结论。因此，强调对药物内部过程的一定程度的了解是必要的。有时以已被证明适合体内样本测定的具体步骤和方法作为对照，检验所建立方法的实际可行性。

三。方法评估:

(1)准确度:测量结果与真值的吻合程度。常用的回收值间接反映了测定的准确性；也可以通过与其他既定方法(参考方法)的比较来体现。当然，100%的回收率是好的，但是很难达到。保持每次测量的稳定性非常重要。

(2)精密度:测量结果与平均值的偏离程度。测量值之间的偏差越小，对测量的要求就越高(成本高)；RSD与浓度成反比关系，RSD在10%以内的方法可以认为是可以接受的。

(C)灵敏度:“一种方法可以检测出最少量的相关化合物”。常用的检测限(LOD)或最小检测量(定量限；；LOQ)来代表。LOD范围从ng (10-9g)到10-18g。

(4)特异性或选择性:是指测得的信号(反应)对受试药物是唯一的。如有干扰，需改进测定方法或改用有分离能力的方法(如色谱法的专属性高于吸收分光光度法)或专属性强的方法。

(5)不同方法测定结果的相关程度比较:用具有相当特异性和可靠性的方法测定与新方法相同的量，用相关系数γ(相关系数)表示相关程度。伽马一般要求在0.95以上。

此外，还应考虑方法的可靠性、每个样品的测定时间、操作难度、技术要求、仪器设备要求、成本等。