仪器分析——层析技术一、层析技术的原理和分类

(一)色谱技术的原理

色谱法是目前广泛使用的分离技术。本世纪初，俄罗斯植物学家M·茨维特发现并利用这项技术证明了植物的叶子不仅含有叶绿素，还含有其他色素。现在色谱已成为生物化学、分子生物学等学科中有效的分离分析工具之一。

色谱是一种基于不同物质物理化学性质差异的技术。所有的色谱系统都由两相组成:一种是固定相，要么是固体物质，要么是固定在固体物质上的组分；另一种是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶剂。当待分离的混合物通过含有溶剂的固定相(流动相)时，由于各组分物理化学性质的差异，相互作用的能力(吸附、溶解、结合等。)与两相不同，在两相中的分布(内容比较)也不同。此外，随着溶剂向前移动，每种组分在两相中不断重新分配。与固定相的相互作用力越弱，随流动相移动时的阻滞作用越小，向前移动越快。相反，与固定相的相互作用越强，组分向前移动越慢。通过收集流出液，可以得到样品中所含的各个单一组分，从而达到分离各个组分的目的。

(二)色谱分类见表。

(3)色谱的特点和应用

根据表格的两个阶段的状态。

流动相
液化气
液-液色谱法气-液色谱法
固定相
固液-固色谱法气-固色谱法

色谱是基于物质不同的物理化学性质的分离分析方法。根据色谱峰的位置、峰高或峰面积，可以定性和定量。色谱可与光学、电学或电化学仪器配合使用，检测色谱后各组分的浓度或质量，同时绘制色谱图。色谱仪和电子计算机的结合可以使操作和数据处理自动化，大大缩短分析时间。由于色谱具有分辨率高、灵敏度高、选择性好、速度快等特点，适用于杂质多、含量少的复杂样品的分析，尤其适用于生物样品的分离分析。近年来，它已成为生物化学和分子生物学中常用的分析方法。它还被广泛应用于医药卫生、环境化学、高分子材料、石油化工等领域。

根据表面色谱原理分类

名称分离原理
吸附色谱组分吸附在吸附剂表面。固定相是具有不同容量的固体吸附剂。
分配色谱的各组分在流动相和静态液相(固相)中的分配系数不同。
离子交换色谱固定相是离子交换剂，各组分对离子交换剂的亲和力不同。
凝胶色谱固定相是一种多孔凝胶。各组分的分子大小不同，在凝胶上的封闭程度也不同
亲和色谱固定相只能与一种待分离的组分特异性结合，使其与其他组分不亲和分离。

表格根据不同的操作形式进行分类。

操作名称
柱层析的固定相安装在柱内，使样品向一个方向前进实现分离
薄层层析将粘度适宜的固定相均匀地铺展在薄板上，进样后用流动相铺展，使组分得到分离
纸层析以滤纸为液体的载体，进样后用流动相铺展
薄层层析。