酶法在中药提取制备中的应用

近年来，工业用酶在国外得到了广泛的应用，如食品工业、饲料工业、天然产物的提取等。从90年代中期开始，国内就有报道将其用于中药的提取和制备，并取得了良好的效果。国内研究进展概述如下。1制药工业中的应用及实例1.1酶法在中药提取中的预处理1.1.1近年来，纤维素酶在各个领域得到了广泛的应用，其在中草药提取中的工业应用也进入了初步发展阶段，国内民用工业学者对此进行了初步探索。大多数中药材的细胞壁是由纤维素构成的，植物的有效成分往往被包裹在细胞壁中。纤维素-D-葡萄糖通过1，4-β-葡萄糖苷链连接。纤维素可以打破β-D-葡萄糖的键，有利于有效成分的提取。根据这一原理，国内有人在从黄柏中提取黄连素时将其作为预处理，并与不加酶的提取进行了比较。经薄层层析，有效成分小檗碱的收率由0.870%提高到1.156%。此后，有人对黄连和穿心莲的预处理进行了研究。薄层层析证明黄连中小檗碱的收率由2.5148%提高到4.2336%。穿心莲内酯的收率可从0.252%提高到0.321%，有效成分的收率明显提高。表明纤维素酶在某些中草药的预处理中具有良好的应用前景。1.1.2另外，有人预先用木瓜蛋白酶对炒过的补骨脂进行预处理。豆科植物补骨脂的种子富含蛋白质。熬制过程中，蛋白质受热凝固，影响其他有效成分的煎制。因此，可以在煎煮前用木瓜蛋白酶对补骨脂粉进行预处理，将蛋白质水解成肽和氨基酸，加热时不会凝固，从而促进各种有效成分煎煮量的增加。与普通煎煮法相比，煎煮液中总氮含量增加了2倍，磷脂含量增加了4倍。补骨脂素和异补骨脂素几乎翻倍。1.2采用酶法提取中药有效成分。用碱法提取海参中的多糖和蛋白质成分时，多糖的得率为鲜海参的0.06%。而采用胃胰蛋白酶结合均质技术降解蛋白质的方法，从海参中提取的多糖是鲜海参的1.45 ~ 1.61%。同时由于蛋白质降解程度高，氨基酸、肽等其他生物活性成分也高，达到了很好的提取效果。目前还没有学者采用复合酶解和热水浸提法从香菇中分离纯化多糖蛋白的报道。与热水提取等其他方法相比，总氨基酸和必需氨基酸含量提高了2倍以上，香菇含量提高了4倍。酶解后，糖类的分布得到了很大的改善，具有高分子量和抗肿瘤、抗病毒活性的香菇相对含量显著增加，效果极其显著。此外，有文献报道日本高根芳春提出了酶法提取银杏叶有效成分。在该方法中，加入糊精和葡萄糖苷酶或可以转移葡萄糖残基的转葡萄糖苷酶，使得油溶性或不溶于水的有效成分可以转化为水溶性成分并被提取。分光光度法测得总黄酮含量为13.6%，总黄酮提取率为0.38%。与未发生转糖苷反应的实验(总黄酮提取率为0.22%)相比，总黄酮提取率提高了0.16%。该方法可以同时提取银杏叶中的水溶性和脂溶性有效成分，提高有效成分的提取率。脂溶性成分在体内转化为糖苷的吸收率大大提高。2酶法提取的主要工艺因素分析2.1药材的预处理是酶解所必需的。如果用球磨机进行预处理，粉碎后的颗粒越细，越容易悬浮在酶解液中，增加有效面积，容易被酶水解，从而加快水解速度。2.2 pH、温度和酶解时间根据提取的中药材品种和所用酶的种类，酶解的最适pH和温度会有所不同，数值要根据实验确定。如果用纤维素酶水解纤维素，应在50℃、pH4.5下进行，用复合酶提取香菇多糖蛋白时，应在40℃、pH6.4下进行，此外，酶解时间也是直接影响提取效果的因素。为了获得所需的酶解产物，需要控制酶的作用时间。比如复合酶解提取香菇多糖蛋白时，确定60min为最佳时间，时间过长或过短都会影响提取效果。3 .酶法提取技术的优缺点及应用前景。以上研究表明，酶法提取明显提高了某些中药的得率，具有很大的应用潜力，但该技术也有一定的局限性。酶法提取对实验条件要求高。为了使酶发挥作用，需要通过实验确定最适温度、pH和最适作用时间。能否用于中药的工业提取，需要综合考虑酶浓度、底物浓度、抑制剂和激动剂对提取物的影响，因此有超前性和进一步的研究和探讨。但随着该技术的不断消化、吸收、研究和应用，酶法作为一种新技术，将为中药提取提供一种新的途径。