复习指导：结核的实验室简述

病原学检查

1.痰涂片显微镜检查

痰涂片染色法查找抗酸杆菌快速简便。厚涂片可提高检出阳性率。荧光染色比抗酸染色更敏感，因为视野开阔，不需要油镜，但容易出现假阳性。

抗酸染色直接镜检不能区分结核和非结核分枝杆菌，但国内非结核分枝杆菌相对较少。涂片发现的抗酸杆菌多为结核杆菌，可提示诊断。观察300视野，油显微镜判断检验结果的标准:0视野/300视野(阴性)；1-2/300视野(可疑阳性)；3 ~ 9/100视野(+)；1 ~ 9/10视野(++)；1° ~ 9°/视野(++)；≥10线/视野(++)。除痰标本外，脓液、病灶组织、纤维支气管镜刷检、冲洗液或冲洗液均可用于直接涂片检查。

2.结核分枝杆菌培养

结核分枝杆菌培养法具有较高的敏感性和特异性。培养后即可进行药敏试验。随着耐多药结核病的增加，药物敏感性变得越来越重要。最近，使用BacteeTB460系统，在Th。含有放射性14 C棕榈酸底物的分枝杆菌培养基，对分枝杆菌产生的放射性14C进行了测量和计算。新的Bactee MGIT960系统用荧光素代替14C，可以避免核素污染。与普通培养相比，Bactec TB系统培养结核阳性的报告时间缩短10天左右，药敏一般在培养阳性后4 ~ 6天完成，能快速区分结核和非结核分枝杆菌。

3.分子生物学检测

聚合酶链式反应(PCR)技术可以扩增标本中微量的结核DNA。一般镜检只能检出104 ~ 105个细菌/ml，而PCR可以检出1 ~ 100 FG的TB DNA(相当于1 ~ 20个细菌/ml)。但由于DNA提取过程中污染等技术原因，会出现假阳性，PCR无法区分活菌和死菌，因此无法用于结核病治疗效果评估和流行病学调查。目前PCR检测只推荐非结核分枝杆菌高发地区抗酸杆菌涂片阳性病例，以快速区分结核和非结核分枝杆菌。存在用于结核分枝杆菌的商业eDNA探针，但是由于复杂的实验程序，它们还没有在临床上应用。采用限制性片段1 engthpo 1多态性(RP1P)的eDNA指纹技术，可用于鉴定分离的结核杆菌是否同源，并可用于流行病学研究。

4.肺结核

且E1ISA法检测痰标本中结核抗原的结果差异较大，可能与痰标本中结核抗原分布不均匀有关。用不同抗原检测肺结核患者血液标本中结核IgG的敏感性和特异性分别为24%-100%和71%-100%。我国以PPD为抗原检测结核IgG，敏感性和特异性分别为60%-80%和90%。抗体检测主要用于临床和X线影像怀疑结核病的患儿的诊断，以及痰标本获取困难和痰涂片阴性的患者。