止喘胶囊提取工艺的优化研究

止喘胶囊是我院根据吴银根教授经验配制的自制制剂。该方主要由淫羊藿和蛇床子组成，具有健脾补肾、化痰祛湿的作用，可用于治疗慢性支气管炎、肺气肿、缓解期支气管哮喘等疾病。原方为汤剂，我院临床观察500余例。为了服用和携带方便，将处方制成胶囊。本研究采用正交设计法，以有效成分辛酸甘油酯为评价指标，优选提取工艺。1仪器及试剂1.1仪器岛津高效液相色谱仪、LC- 10ATVP泵、CTO- 10ASVP柱温箱、SCL- 10AVP系统控制器、SPD-M10AVP检测器、UV- 2450分光光度计、BS- 110分析天平、Kromasil柱。1.2试剂甲醇为色谱纯试剂，水为蒸馏水，其他试剂为分析纯。使用前，所有试剂均经过孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤；所有药材均购自上海徐汇中药饮片厂，经上海市药品检验所吴教授鉴定。*淫羊藿为小檗科柔毛淫羊藿*淫羊藿全草。对照品*朝藿定由中国药品生物制品检定所提供(批号:0737 -200117)。2试验方法2.1色谱条件:Kromasil C18(250 mm×4.6mm，5 μm)；检测波长为270nm；；柱温:35℃。溶剂系统:甲醇-1.25%乙酸溶剂系统用于梯度洗脱。流动相:0.00~14.00 min，乙酸水(0.5 ∶39.5)∶甲醇= 43∶57；从14.01~25.00分钟，醋酸水(0.5 ∶39.5)∶甲醇=57 ∶43，流速为1.0毫升/分钟。2.2对照品溶液的制备准确称取*朝藿定对照品于棕色容量瓶中，用甲醇制备浓度为0.1140 μg/μl的*朝藿定对照品溶液。2.3样品溶液的制备将正交设计实验得到的提取液适量用甲醇溶解、稀释、过滤，然后用甲醇配制成一定浓度的样品溶液。2.4 *淫羊藿阴性样品的制备*取处方中缺少淫羊藿的其他药材，按提取淫羊藿苷(A2B1C2)的工艺制备淫羊藿阴性样品溶液。2.5 *辛酸甘油酯含量的测定参考药典及相关文献[1 ~ 3]，分别吸取上述阴性供试品溶液、对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，计算样品中*辛酸甘油酯的含量。2.6正交试验方案传统水煎煮法提取* caprylin:提取，过滤，合并滤液，浓缩，真空空干燥得粉末，计算浸膏得率，测定* caprylin的含量。选取煎煮次数、煎煮时间和加水量为三因素，进行三因素三水平L9(34)正交试验。以浸膏得率和辛酸甘油酯含量为指标，优选提取工艺。2.7验证实验采用正交试验结果得出的提取工艺，进行三批验证实验。结果3.1各组高效液相色谱图的比较*水杨苷表明方法专属性强，阴性对照无干扰。3.2正交试验结果结合方差分析和干浸膏得率试验结果表明，煎煮次数对提取效果影响显著，煎煮时间和加水量影响不显著。提取工艺为A2B1C2，即加10倍量水，煎煮2次，每次0.5 h. 3.3验证实验结果表明，所选提取工艺条件稳定，重现性好，为该提取工艺。4 .讨论本研究采用不同的溶剂体系和不同的提取方法对处方中的有效成分*朝藿定和蛇床子素进行提取，正交试验结果表明*朝藿定的最佳提取工艺条件为:本研究采用二极管阵列检测器(DAD)测定朝藿定的含量。该方法简单易行。该制剂的提取方法同时采用水提和醇提。虽然复杂，但能在有限的范围内提取出药物的有效成分，在保证疗效上比单一的提取方法要好。