体内药物分析——测定前样品的制备

除少数体液经简单处理后直接测定外，通常在最终测定前要进行适当的样品制备，即分离、纯化、浓缩，必要时对待测成分进行化学修饰，为测定创造有利条件。

首先，样品制备应考虑:

药物的理化性质，待测物质的浓度范围，药物测定的目的，所选生物流体和组织的类型，样品制备与分析技术的关系。

二。蛋白质的处理:

这是测定血浆、血清、全血、组织匀浆和其他样品中药物的第一个处理步骤。

(1)加入沉淀剂和变性剂:硫酸铵是经典的蛋白质沉淀剂，与蛋白质分子竞争体系中的水分子，导致蛋白质的沉淀。阴离子沉淀剂(三氯乙酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸)与带电蛋白质在等电点pH下形成不溶性盐；相反，阳离子沉淀剂(含锌盐和铜盐)与蛋白质分子中带负电的羧基在高于蛋白质等电点时形成不溶性盐。相关机制不是很清楚。

(2)加入能与水混合的有机溶剂:乙醇过量时，能释放与蛋白质结合的药物。可以将混合物离心，取上清液(含药物)，但这不能解决样品纯化的问题。蛋白沉淀法对蛋白结合能力强的药物回收率差。酸消化也用于从蛋白质结合位点释放药物，但它经常导致药物分解。

(3)组织的酶消化:蛋白酶中的枯草杆菌蛋白酶不仅能水解组织，还能沉淀药物。

优点:1。由于是在稳定的条件下进行，可以避免某些药物在酸中水解，在较高温度下降解；

2.能显著提高蛋白结合率强的药物的回收率；

3、可以用有机溶剂直接提取消化液，没有乳化的危险；

4.使用HPLC时，不需要进行太多的纯化操作。缺点是不适合一些在高pH值下容易水解的药物。