药分：分光光度法

第六章分光光度法
第一节紫外-可见分光光度法
一、基本原理
紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长200-760nm电磁波的吸收特性，进行定性、定量和结构分析的方法。操作简单，准确度高，重现性好。
波长长(频率低)的光能量低，波长短(频率高)的光能量高。
100n m 200nm 400nm 800nm 400um 1m
指
X射线紫外可见区红外区微波区无线电波区
比尔-朗伯定律:A = E L C A-吸光度E-吸收系数l -液层厚度C .它是吸收分光光度法的基本定律，重要前提是单色光。
摩尔吸收系数:指浓度为1mol/L、厚度为1cm的溶液在某一波长下的吸收，用表示。
百分吸收系数:指溶液浓度为1%(W/V)，厚度为1cm时，在某一波长处的吸光度，用表示。
影响比尔定律的因素:化学因素，光学因素
二。紫外-可见分光光度计:主要组件:
1。光源:具有所需光谱的光源，2。氢灯和钨灯(350纳米)
3。单色仪:入口狭缝，狭缝
4。吸收池:由光学玻璃制成的吸收池。5.它只能在可见光区使用。使用熔融应时(二氧化硅)，6，可见紫外区。
7。探测器:光电池:(硒光电池:用于可见光；硅光电池:紫外和可见光)内阻小，8。容易疲劳。
光电池:内阻高，容易放大电流。
9。信号处理和显示。定性定量方法:
(一)定性鉴别:大部分有机物具有吸收光谱特征。用一般的比较法。
1、比较吸收光谱的特征数据2、比较吸收的比值(或吸收系数)3、比较吸收光谱的一致性
(2)、纯度检查:杂质检查和杂质限量检测
(3)、含量测定:
1、吸收系数法2、标准曲线法3。荧光法比紫外可见光更灵敏。
荧光光度计:激发光源、样品池、检测器、滤光片和单色仪。
第三节红外分光光度计
红外线:波长大于0.76um小于500um的电磁波。胡克定律用来描述分子的伸缩振动。
当分子的振动频率与入射红外频率相同时，分子吸收红外。伸缩振动和弯曲振动。
基频峰:分子吸收一定频率的红外线，振动能级从基态(V=0)跃迁到第一激发态时产生的吸收峰。
倍频峰:振动能级从基态跃迁到第二、第三激发态。通常被称为泛音峰。
吸收峰:用于鉴别官能团存在的吸收峰称为特征吸收峰。
指纹区:1250-400cm (8.0-25um)的低频区称为指纹区。
红外分光光度计的主要部件:光源、吸收池、单色仪(棱镜和光栅)、检测器(真空热电偶)、记录装置。