生物实验——硫酸鱼精蛋白生物检定法

该法律体系比较肝素标准品和试验品延长新鲜兔血或猪和兔血浆凝固时间的程度，以确定试验品的效价。

肝素标准溶液的配制准确称取适量肝素标准溶液，根据标示的效价加入0.9%氯化钠溶液，使其溶解成几种不同浓度的溶液。相邻两个浓度每1ml的肝素单位数之差应相等，且不超过5个单位。一般每1ml可配制成85、90、95、100、105、110、115、120、125个单位。供试品溶液的制备如果供试品为粉末，准确称取适量，以干燥品计算，加入0.9%氯化钠溶液，使其溶解成每1ml含1mg的溶液。若供试品为注射液，按标示量加入0.9%氯化钠溶液，稀释至相同浓度。根据肝素生物测定中的血浆制备方法制备血浆(附录D)。

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取8支洁净干燥、直径均匀(0.8×3.8cm)的小试管，第一管和第八管为空白色对照管，加入0.2ml 0.9%氯化钠溶液，第二至第七管为试管，每管加入0.1ml试液，然后每管加入0.1ml上述浓度的肝素标准稀释液，立即混匀。取适量新鲜抽取的兔血，加入上述8个试管中，每管0.8ml，立即混匀，避免产生气泡，开始计时。将小试管置于37±0.5℃的恒温水浴中，从采集动物血液开始到小试管置于恒温水浴中的时间不得超过2分钟；如果使用血浆，在上述各管中加入0.7ml血浆，在37±0.5℃的恒温水浴中预热5 ~ 10分钟，在各管中加入0.1ml的1%氯化钙溶液，立即混合以避免产生气泡，并开始计时。观察并记录每根管子的凝固时间。结果判断

两个控制管之间的凝固时间差不得超过1.35倍。在样本管的凝固时间小于两个对照管的平均凝固时间的150%的管中，具有肝素浓度的管用作终点管。重复5次，通过5次试验测定末端管的肝素浓度，差值不得大于10单位。五次结果的平均值为硫酸鱼精蛋白试验品(干品)中1mg中和肝素的单位数。